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哮喘候选基因的研究进展
哮喘 候选基因 基因研究策略
2009/10/29
哮喘是一个环境与遗传相互作用的多基因遗传性疾病，基因多态性、基因表达差异、基因之间、基因表达产物之间以及基因与环境因素之间相互作用，导致哮喘不同的病理生理改变，因而对哮喘候选基因的筛选及其与哮喘发病的基础研究仍在起步阶段。应用现代分子生物学遗传策略，通过基因定位克隆、遗传多态性连锁分析、基因芯片技术和蛋白质组学研究方法，目前哮喘的遗传学研究取得了一些进展。本文对哮喘候选基因的染色体定位、部分基因在...
目的：构建CD80/IgG真核表达载体，使其在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中呈分泌型表达，为白血病免疫基因治疗的研究奠定基础。 方法： 采用多聚酶链反应（PCR）技术分别从小鼠脾细胞和含小鼠CD80全长互补DNA（cDNA） 的质粒pcDNA/B7中扩增出免疫球蛋白IgG1的Fc段和CD80胞外区，以定向克隆的方法将其串联至真核表达载体pcDNA3.0中，获得重组表达载体pcDNA/CD80-IgG...
目的：比较缺氧对世居高原藏族人和移居高原汉族人脐静脉内皮细胞（UVECs）血管内皮生长因子（VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS） mRNA表达的影响。 方法： 分离脐静脉内皮细胞，体外原代培养，分为①世居高原藏族组和②移居高原汉族组两组，每组包括常氧对照和缺氧(0.5% O2)2 h、4 h、12 h和24 h时点。分离细胞总RNA，分别用RT-PCR检测VE...
我国汉族人群α1基因数目可变串联重复序列分布特征的研究
免疫球蛋白A 可变数量串联重复 多态现象(遗传学) 中国人
2009/10/27
目的：研究我国汉族人群免疫球蛋白α1基因中3个数目可变串联重复序列(VNTR)多态性分布特征，及其与已报道的高加索人群相比较的特点。 方法: 从现存数据库中寻找α1基因内的3个VNTR位点，即α1基因3’端的hs1,2增强子内的VNTR1、其上游6 Kb 的VNTR2和位于α1基因第5外显子的E5VNTR。 提取201例广东汉族人基因组DNA，PCR分别扩增含上述3个VNTR位点片段，2%－3％凝...
细胞内钙信号对锌指转录因子及胚心标志基因的调控
钙 心肌 钙凋神经磷酸酶 有丝分裂素激活蛋白激酶类
2009/10/27
目的：探讨心肌细胞内游离钙离子浓度（［Ca2+］i）变化对锌指转录因子及胚心标志基因的影响。 方法: 以原代培养的乳鼠心肌细胞为模型，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及雷尼丁(RY)剌激心肌细胞跨膜钙内流及细胞内钙释放; Fura-2/AM比率荧光成像系统分析细胞内钙信号；免疫印迹(Western blotting)检测心肌细胞钙调神经磷酸酶(CaN)、活化T细胞核因子（NFAT3）、锌指转录因子（GAT...
肝豆状核变性基因与肿瘤耐药的研究进展
肝豆状核变性 顺铂 多药耐药
2009/10/15
肝豆状核变性基因（ATP7B）定位于13q14.3区，编码一种铜转运P型ATP酶。ATP7B的突变使其蛋白缺乏或丧失转运肝铜的功能，导致肝、肾和脑等组织铜累积过多，表现为慢性肝病和（或）神经损害，ATP7B蛋白对铜的转运机制尚未明了。ATP7B在多种肿瘤细胞中表达对顺铂耐药，研究表明ATP7B除了是铜的转运蛋白外，还可能转运顺铂，但转运位点不清楚。ATP7B可能是一个新的肿瘤化疗耐药指标。
基因沉默的维持——长效RNA干扰
RNA干扰 基因沉默 小干扰RNA RNA干扰组合治疗
2009/10/15
自揭示了哺乳动物细胞中的RNA干扰（RNAi）现象以来，对其进行了大量的研究与资金投入，期望将其发展成一种切实可行的治疗手段。毫无疑问，RNAi是最具发展潜力的基因治疗策略。由于许多采用RNAi治疗的疾病需要长期用药，因此，有关RNAi类药物长期应用的安全性问题成为关注重点。
Diabetes—Role of epigenetics,genetics,and physiological factors
epigenetics miRNAs genetics genome wide association
2009/10/12
Diabetes—Role of epigenetics,genetics,and physiological factors。
目的：探讨EGFR/HER2基因沉默对非小细胞肺癌细胞株EGFR酪氨酸激酶信号转导通路的交互影响及其与细胞增殖、凋亡和周期改变的关系。方法： 设计并合成EGFR、HER2及 EGFR/HER2共干扰序列，构建含干扰序列的载体，进行瞬时转染；应用实时荧光定量、蛋白印迹法检测基因沉默效果；用四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞仪检测基因沉默后生物学特性改变；蛋白印迹法检测EGFR下游信号通路蛋白Akt、p-...
肺癌候选抑瘤基因HLCDG1片段的验证及全长序列的克隆
基因 HLCDG1 基因 CSNK1A1 DNA末端快速扩增法 肺肿瘤
2009/10/12
目的： 对肺癌候选抑瘤基因HLCDG1片段（已知序列）进行验证，并克隆其全长cDNA序列。方法: 采用RT-PCR和末端快速扩增技术(RACE)，对正常人肺组织中HLCDG1基因片段进行验证和克隆其全长cDNA序列，登录基因数据库进行比对分析。结果: 从正常人肺组织中钓取到HLCDG1基因未知的3’端和5’端序列分别为1 304 bp和1 548 bp。HLCDG1基因与人酪蛋白激酶Ⅰα（CSNK...
目的：应用分子生物学技术，构建胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)和神经分化因子1(NeuroD1)转录因子真核表达质粒，检测其能否在真核细胞中有效表达并诱导人肝细胞转分化的能力。方法:以人胚胎胰腺组织mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1和NeuroD1基因，分别克隆到真核双表达载体pIRES质粒的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中，构建pI/Pdx1/NeuroD1真核表达质粒，...
PRL-2基因转染对肝细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响
肝细胞 蛋白质酪氨酸磷酸酶 基因转染 基质金属蛋白酶
2009/8/27
目的:研究PRL-2基因增强肿瘤细胞侵袭及转移能力的机制。 方法:采用脂质体转染的方法将PRL-2基因表达质粒转染至正常永生化肝细胞系CL1中，G418筛选阳性克隆。应用明胶酶谱法检测转染肝细胞分泌MMPs 酶谱变化，Western blotting 及RT-PCR检测转染肝细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的变化。以PRL-2磷酸酯酶特异性抑制剂处理转染细胞，观察抑制PRL-...