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目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-kappaB亚单位p65的表达, 观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响. 方法: 将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中, 通过RT-PCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平. Western blotting法检测p65和B...
靶向5-LOX的siRNA诱导胰腺癌细胞的凋亡
RNA干扰 5-脂氧合酶 胰腺癌 细胞凋亡
2009/2/8
目的: 采用RNA干扰技术(siRNA)阻断5-LOX基因的表达, 观察其抑制人胰腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用. 方法: 构建靶向5-LOX的siRNA质粒表达载体, 采用Lipofectamine-2000转染人胰腺癌细胞株SW1990, 采用RT-PCR检测RNA干扰后5-LOX mRNA表达, MTT法检测细胞的增殖抑制率, 流式细胞仪检测细胞凋亡率. 结果: 靶向5-LOX序列特异性的...
目的: 探讨血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在肿瘤细胞生长中的作用. 方法: 根据人VEGFR-3 mRNA编码序列, 设计3个RNA干涉靶点, 构建siRNA表达载体, 并转染到LoVo细胞中, 应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3 mRNA表达水平的变化, 采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)观察细胞生长变化, 并应用流式细胞计数仪分析细胞凋亡的情况. 结果: 针对VE...
检测siRNA干扰细胞外信号调节激酶ERK1/2基因表达对 ezrin 基因的转录调控作用，探讨食管癌细胞 ezrin 基因的表达调控机制。
siRNA介导的hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞凋亡的影响
RNA干扰 基因 hPOT1 凋亡
2008/12/18
目的 应用siRNA表达载体介导的RNAi技术，特异地抑制端粒保护蛋白hPOT1基因在HeLa细胞中的表达，并观察其对细胞凋亡的影响。方法 利用先前构建的含hPOT1基因特异性序列（hsRNA）的3种重组siRNA表达质粒，由脂质体介导转染HeLa细胞，以RT-PCR和电泳迁移率变化分析法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果，并通过流式细胞术、Hoechst荧光染色和DNA琼脂糖凝胶电泳...
目的： 利用RNAi技术探讨P21蛋白表达对HeLa 细胞周期解耦联和细胞凋亡的影响。方法： 丝裂霉素刺激HeLa细胞后可诱导P21蛋白高表达，采用脂质体转染技术将p21 siRNA 载体转染至HeLa细胞48 h后给予MMC刺激，利用流式细胞术检测HeLa细胞的P21蛋白表达、 细胞倍体的形成和细胞凋亡的改变。结果： p21 siRNA 载体可有效干扰经MMC诱导的HeLa细胞中P21蛋白表达,...
目的： 探讨CD73对乳腺癌细胞MB-MDA-231与细胞外基质黏附的影响及其机制。方法： ① 构建CD73 siRNA表达载体，脂质体介导转染MB-MDA-231细胞。② 流式细胞仪检测瞬时转染效率，G418筛选稳定转染克隆。③ 半定量RT-PCR和Western blotting检测转染细胞 CD73 mRNA及蛋白表达。④ 细胞黏附实验检测MB-MDA-231细胞CD73基因表达抑制后与细胞...
siRNA抑制DNA-PKcs表达及对HeLa细胞增殖的影响
DNA-PKcs RNA干扰技术 辐射敏感性 细胞增殖
2008/10/27
背景与目的： 建立抑制DNA-PKcs表达的细胞模型，以此探讨DNA-PKcs的功能。材料与方法：构建DNA-PKcs的siRNA抑制表达载体，利用Lipofectamine介导，转染HeLa细胞，筛选稳定表达的转化克隆。Western blot检测DNA-PKcs表达。通过细胞生长速度检测细胞辐射敏感性变化。 结果： 设计了作用于DNA-PKcs不同位点的3条siRNA，并构建表达质粒，转染He...
抗肿瘤、抗肝纤维化和抗病毒siRNA药物开发
RNA药物 抗病毒 抗肿瘤 抗肝纤维化
2008/10/14
该企业拥有siRNA合成技术和建立了高通量siRNA平台，为国内外的生物技术公司、制药公司、高校及科研单位提供高质量的siRNA合成服务；应用这一平台技术进行大规模的药靶发现和确认、抗肿瘤和抗肝肺纤维化及抗病毒的siRNA药物开发。正在进行高效低毒型siRNA纳米粒给药系统研发：防治禽流感特效siRNA药物的研发；靶向特异性小干扰RNA防治肝纤维化的药理作用研究；抗肺癌siRNA新药临床前研究。
该发明公开了一种抑制人、小鼠Bax基因表达的siRNA及其针对Bax基因的shRNA表达载体，并且进一步提供了Bax基因的shRNA表达载体作为乙型病毒性肝炎保肝治疗药物的应用。该发明利用shRNA表达载体在体内进一步表达siRNA的方法实现抑制Bax基因表达、降低乙肝的肝细胞凋亡、减轻肝细胞损伤、改善预后的目的，不仅避免了化学合成法、体外转录法等技术所存在的siRNA易降解，操作技术难度高等缺陷...
抑制PCNA基因表达的siRNA序列及其应用
siRNAPCNA 基因
2008/9/3
该发明属于分子生物学与生物医药领域，公开了一种高效抑制PCNA基因表达的siRNA序列及其在制备抗肿瘤药物中的应用。应用PCNAsiRNA可以更高效、特异、方便的抑制靶基因的表达。该发明筛选出能高效抑制PCNA基因表达的siRNA序列，并作用于肿瘤细胞，检测微量PCNAsiRNA抑制PCNA表达后肿瘤细胞在增殖、细胞周期及凋亡方面的变化，为PCNAsiRNA应用于恶性肿瘤的临床治疗奠定重要基础。
抑制bcl-2基因表达的siRNA双链及其应用
siRNA bcl-2 基因
2008/9/3
该发明公开了四组siRNA双链序列，它们可抑制bcl-2抗凋亡基因的表达，能有效地抑制bcl-2蛋白表达和翻译，从而减少bcl-2蛋白合成，以求恢复细胞的正常凋亡调控能力，最终达到延缓肿瘤生长的目的，是很好的抗白血病和肿瘤细胞耐药性的小分子双链核酸药物。
探讨发夹状shRNA封阻c-myc基因，抑制人结直肠癌Colo320细胞增殖、生长的状况。
探讨VEGFR 3对人结肠癌细胞黏附力和侵袭性的影响。方法:构建携靶向 VEGFR 3基因siRNA(small interfering RNA)表达载体，转染人结肠癌LoVo细胞， 半定量RT PCR和Western blotting检测转染前后LoVo细胞VEGFR 3mRNA和蛋白表达的变化，基质 黏附实验检测细胞转染后的黏附能力，细胞侵袭实验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变。结果:携靶...
探讨缺氧诱导因子 1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF 1α）特异性siRNA调节肿瘤组织乏氧状态的抗肿瘤效应。方法：构建含有HIF 1α特异性RNAi序列的重组腺病毒载体，建立携带VX2肿瘤细胞的荷瘤模型兔。将构建好的重组腺病毒载体注入兔耳缘静脉中进行治疗，以注入无干扰序列腺病毒载体为对照。采用正电子发射计算机断层显像(positron emission comp...