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靶向PI3Kp85α的siRNA抑制人卵巢癌细胞系生长的实验研究
PI3Kp85&alpha RNAi 卵巢癌 增殖
2014/5/31
探讨siRNA靶向抑制卵巢癌细胞磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基p85α（phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit p85 alpha，PI3Kp85α）表达后，对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法：应用siRNA靶向PI3Kp85α转染人卵巢癌细胞系SKOV3，Realtime PCR检测目的基因mRNA表达，Western blot和免疫荧光技术检测PI3...
利用小分子RNA干扰沉默碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因的表达，探讨其对肺腺癌A549细胞Oct-4表达、细胞增殖和凋亡的影响。方法 将A549细胞分为转染干扰质粒组(干扰质粒组)、转染阴性对照质粒组(阴性对照组)和未转染质粒组(空白对照组)。采用Real-Time PCR检测质粒干扰后A549细胞bFGF基因mRNA表达的变化； Western Blot检测Oct-4蛋白表达的变化；...
靶向VEGF的不对称siRNA抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖
不对称siRNA 血管内皮生长因子 增殖 凋亡
2014/3/24
探讨靶向血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）基因的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞的抑制效果。方法：设计靶向VEGF的4种小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA），包括对称siRNA（siRNA21/21，siRNA23/23）与不对称siRNA（asymmetric siRNA, aiRNA；ai...
探讨靶向B7-H4基因的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移的影响。方法：体外化学合成B7-H4特异性siRNA（B7-H4-siRNA），转染A549细胞，MTT法、流式细胞术、Western blotting分别检测A549细胞的增殖、细胞周期，以及B7-H4和Cyclin D1蛋白的水平；Transwell实验检测A5...
应用TPX2-siRNA转染Hela细胞，探讨TPX2基因沉默后对Hela细胞增殖和侵袭力及周期分布的影响。方法：合成TPX2特异性的siRNA 4对，随机siRNA阴性对照1对。Lipofectamine 2000介导siRNA转染Hela细胞株。RT-PCR检测转染前后mRNA表达的变化，Western blot检测转染前后蛋白表达的变化，MTT、流式细胞术（FCM）、Transwell小室和...
特异性抑制环氧合酶-2表达的siRNA筛选
环氧合酶-2 siRNA RT-PCR 转染
2012/11/2
筛选有效抑制环氧合酶-2(COX-2)表达的小干扰RNA(siRNA)序列，并观察其对细胞中COX-2表达的抑制作用。方法 设计针对COX-2的3对(siRNA24，siRNA954，siRNA1553)及一条FAM荧光标记的阴性对照siRNA(称为HK)。在Lipofectamine2000介导下转染人胃癌细胞系SGC-7901。同时采用RT-PCR法和Western blot方法检测细胞中CO...
研究XIAP siRNA对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(Tumor Necrosis Factor-related Apoptosis-Inducing Ligand,TRAIL)诱导结肠癌细胞SW620凋亡的影响。方法SW620细胞分为转染XIAP siRNA组、空转染对照组或者siRNA阴性对照组,然后给予TRAIL处理。XIAP 表达水平的变化、细胞增殖抑制、Caspase-3活性分别由W...
新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体的构建及鉴定
新生隐球菌 RNA干扰 MIS1
2012/8/6
目的 构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒,并进行鉴定。方法 根据GenBank的MIS1基因序列,按照载体要求设计单链引物,克隆到空载体psilencer4.1-CMV neo中,经过LiAc化学法将重组质粒转染到新生隐球菌细胞中并用G418筛选,利用real time PCR鉴定阳性细胞的MIS1基因水平。结果 重组表达质粒Psilencer4.1-CMV-si-MIS1...
siRNA表达载体对宫颈癌Caski细胞凋亡和增殖的影响
siRNA表达载体 宫颈癌 细胞增殖 凋亡
2011/10/14
目的: 观察HPV16 E6 siRNA表达载体对宫颈癌Caski细胞凋亡和增殖的影响。方法： 利用脂质体将HPV16 E6特异性siRNA表达载体转染Caski细胞，通过荧光定量RTPCR检测E6 mRNA的变化，流式细胞仪检测E6蛋白和细胞凋亡率的变化，MTT法和细胞克隆法检测细胞增殖的变化。结果： HPV16 E6 siRNA表达载体可明显抑制Caski细胞E6 mRNA和E6蛋白的表达，...
miRNA与siRNA胃癌相关研究的现状及进展
微小RNA 小干扰RNA RNA干扰 胃癌
2013/7/28
RNA干扰是表观遗传学的研究热点, 它参与基因复制后表达调控, 并与肿瘤发生密切相关。近年对RNA干扰研究较多的是微小RNA和小干扰RNA。文章概述了微小RNA和小干扰RNA的基本理论, 并综述它们在胃癌研究中的现状及进展。认为RNA干扰分析和应用是研究胃癌相关基因功能及作用机制的有效方法, 并将对胃癌的诊治产生巨大影响。
CD147-siRNA对甲状腺乳头状癌K1细胞侵袭能力的影响
RNA干扰 CD147 MMP7 肿瘤侵袭
2013/12/25
研究小干扰RNA对人甲状腺乳头状癌K1细胞CD147表达及细胞侵袭能力的影响，并筛选出有效的siRNA序列。方法 人工设计合成3对CD147-siRNA，并将CD147-siRNA转染人甲状腺乳头状癌K1细胞来沉默CD147基因的表达。用RT-PCR、ELISA分别测定CD147 mRNA和其蛋白的表达，从而验证CD147-siRNA的干扰效果；用 RT-PCR、Western blot技术分别测...
聚乙二醇修饰的阳离子脂质体作为siRNA传递系统的处方优化
细胞膜表面结合 细胞内吞 基因传递系统
2012/3/31
研究摩尔分数为0%~5%的聚乙二醇（PEG）修饰的阳离子脂质体作为siRNA传递系统的优劣。制备了两组高低电荷的空白阳离子脂质体，分别含有摩尔分数为40%和20%的1,2-二油酰基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP），以人胰腺癌细胞株Hs-766T作为细胞模型，比较了细胞膜表面结合量及内吞量分别随时间和细胞外给药浓度变化的动力学曲线；结果显示4 h时细胞表面结合达到稳态，高电荷脂质体组与细胞的结合量明...
探讨RNAi技术经慢病毒载体介导的siRNA对Jiyoye细胞c-myc基因表达的抑制作用。方法 设计并合成RNA干扰序列,退火后连接到pLVX干扰载体上，构建PLVX-c-myc表达载体,经慢病毒介导转染人Jiyoye细胞株培养72h。实验分为空白对照（未转染）、c-myc-neg、c-myc-1、c-myc-2、c-myc-3组。采用流式细胞术检测各组细胞转染率，采用real-time...
探讨靶向羧肽酶B2(CPB2)基因的小干扰RNA(siRNA)对乳腺癌MDA-MB-231细胞凝血酶激活的纤溶抑制物（TAFI）表达以及对乳腺癌细胞的生长和转移的影响。方法 将细胞分为siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组、阴性对照组和空白对照组5组，设计并化学合成编码TAFI基因（CPB2）的特异性siRNA，用脂质体2000转染至MDAMB-231细胞中，采用Weste...
研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1（ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1， OAZI-1）的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。 方法： 构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-1及对照psilencer2.1-U6/scrambled质粒，脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞，W...