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构建pCDNA3.1-ENDO-VEGI151/survivin-shRNA(pEV/si-survivin)双功能表达质粒，观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUEVC)增殖和凋亡的影响，探讨其治疗肿瘤的可行性。 方法： 利用MDA-MB-231细胞筛选获得survivin的高效siRNA...
化疗是急性髓系白血病的标准治疗手段, 然而白血病细胞多药耐药的产生为白血病化疗的主要障碍. 在耐阿霉素的K562 细胞株(K562/ADR)中, MRP4 表达较不耐药的K562 细胞株明显增高. 本研究试图运用慢病毒介导的siRNA 沉默MRP4 基因后研究能否增强K562/ADR 对阿霉素的敏感性. 首先设计并构建了5 个针对MRP4 基因的慢病毒介导的siRNA (lv-shRNAs-MRP...
观察低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor -1α, HIF-1α )RNA干扰对低氧条件下永生化角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的影响。方法: 将HaCaT细胞分为4组:常氧对照组(无干预因素)、低氧组(低氧培养24 h)、脂质体对照组(转染空载脂质体后低氧...
目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌细胞VEGF-C表达，探讨干扰后VEGF-C、NF-κB、bcl-2基因的表达。方法根据人VEGF-C mRNA编码序列，设计RNA干扰的靶点，并用脂质体转染人宫颈癌HeLa细胞，通过RT-PCR法观察转染后肿瘤细胞VEGF-C、NF-κB、bcl-2基因的变化。结果转染siRNA 24h、48h可以使HeLa细胞VEGF-C mRNA含量降低，在24h降低80.6...
siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡
RhoC基因 siRNA 肝肿瘤 凋亡
2012/4/18
研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制，为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法: 构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFP RhoC-siRNA，转染BEL7402细胞，激光共聚焦显微镜检测转染效率，RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果；流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡，R...
研究靶向抑制二肽基肽酶-Ⅳ（DPP-Ⅳ）基因的小干扰核糖核酸（siRNA）对糖尿病模型小鼠的降糖作用。方法：根 据DPP-Ⅳ的refseq 序列及siRNA 设计原理设计3 条靶向作用于DPP-Ⅳ基因不同位点的siRNA（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3）；另 取小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素150 mg·kg－1建立糖尿病模型，成功后随机分为模型对照组、siRNA-1 组、siRNA...
Survivin是IAP家族的新成员，具有抑制凋亡和调节细胞增殖的双重作用，是迄今发现最强的凋亡抑制因子。本项研究的目的是通过将survivin的小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）表达载体分别转染至肺癌细胞SPCA1和SH77，分析survivin siRNA对不同肺癌细胞的增殖抑制作用。方法 构建靶向survivin的siRNA表达载体与pSi scramb...
siRNA抑制食管癌EC9706细胞CXCR4基因表达的实验
CXCR4 RNA干扰 食管癌 转移
2013/12/26
运用RNAi技术沉默食管癌EC9706细胞CXCR4（chemokine receptor4）基因表达,观察其对肿瘤细胞的生长和转移影响。方法设计CXCR4 基因为靶向的siRNA ,构建siRNA表达载体，通过脂质体将siRNA表达载体转入EC9706细胞。荧光定量PCR法检测细胞CXCR4 mRNA表达水平；流式细胞术检测细胞周期； MTT法检测细胞侵袭和增殖的情况。结果构建出CXCR4 基因...
EGFRvⅢ的siRNA对胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响
表皮生长因子Ⅲ型突变体 RNA干扰 胶质瘤 U87
2013/12/26
研究EGFRvⅢ的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞中EGFRvⅢ的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响。 方法化学方法合成特异针对EGFRvⅢ的siRNA，转染U87-EGFRvⅢ细胞后，利用半定量RT-PCR法检测细胞中EGFRvⅢ的mRNA表达，采用蛋白印迹法和免疫荧光法检测细胞中EGFRvⅢ的蛋白表达水平，MTT法检测siRNA对胶质瘤细胞增殖的作用，Annexin V-FITC/PI法...
研究Bcl-xL基因特异性RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞株体外增殖能力和凋亡的影响。方法构建靶向Bcl-xL的小干扰RNA(siRNA)表达载体，转染PC-3细胞后，采用半定量RT-PCR和Western blot法检测转染前后Bcl-xL mRNA及蛋白表达水平的改变；采用噻唑兰(MTT)法检测细胞生长增殖情况；TUNEL试剂盒测定细胞的凋亡情况。结果靶向Bcl-xL的序列特异性的siRNA可...
siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用
α5-尼古丁乙酰胆碱受体 siRNA 肺癌 尼古丁 增殖
2012/5/17
研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5（cholinergic receptor nicotinic alpha 5, CHRNA5 ）基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响。 方法： 设计并合成CHRNA5-siRNA片段，并经脂质体介导转染A549细胞。荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中 CHRNA5 mRNA和蛋白的表达，MTT法检测C...
慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的实验
血管内皮生长因子C RNA干扰 慢病毒载体 MCF-7
2013/12/27
研究慢病毒载体介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞系VEGF-C表达的敲减作用。方法构建慢病毒VEGF-C/siRNA载体，转染乳腺癌MCF-7细胞，采用Real-time PCR检测MCF-7细胞在转染前后VEGF-C的mRNA表达，计算其转染效率和VEGF-C敲减率。结果慢病毒VEGF-C/siRNA转染效率超过80%，其VEGF-C的mRNA表达敲减率达50%。结论慢病毒VEGF-C/si...
合理设计siRNA下调锌指蛋白A20的表达促进DC成熟
树突状细胞 锌指蛋白A20 siRNA
2012/5/17
比较针对锌指蛋白A 20 基因不同位点的siRNA对正常人DC成熟度的影响。 方法： 根据A 20 基因序列特点，针对 A20 C端的锌指结构-5区（zinc finger-5,Zif-5）、Zif-2和N端的序列分别设计合成了Si1、Si2和Si3三条siRNA，以脂质体法转染正常人DC，RT-PCR和Western blotting检测DC中 A20 mRNA和蛋白表达水平，流式细胞术检测DC...
间皮素siRNA慢病毒对卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗效果
间皮素 RNA干扰 慢病毒 基因治疗
2012/5/17
探讨间皮素（mesothelin,MSLN）siRNA慢病毒对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用。 方法： 利用人卵巢癌SKOV3细胞建立卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为3组：治疗组、阴性对照组和空白对照组。治疗组应用携间皮素siRNA慢病毒液(LV-MSLN-shRNA)对裸鼠模型进行治疗，阴性对照组采用空载体(LV-MSLN-neg)慢病毒液进行治疗，空白对照组注射PBS治疗。从裸鼠生长一般情...