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ABCE1基因SiRNA表达质粒的构建及鉴定
siRNA 质粒 ABCE1基因 构建
2008/5/27
目的：构建针对人ABCE1基因siRNA表达质粒，为进一步研究该基因功能奠定基础。方法：合成含靶向ABCE1基因siRNA转录模板的茎环结构，与两端分别有BamHⅠ、Hind Ⅲ酶切位点的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒连接，大肠杆菌中扩增，测序鉴定。结果：转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,重组质粒电泳初步说明质粒构建成功,测序结果表明RNAi-Ready...
针对HBVx基因的siRNA重组腺病毒的制备及其对HBVx基因表达的抑制作用。
B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的影响
RNA干扰 B-RAF基因 胃癌细胞 细胞凋亡
2008/1/21
摘要为探讨B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的增殖和凋亡的影响, 设计并合成B-RAF小分子干扰RNA(B-RAF-siRNA)和阴性对照siRNA, 用TransMessenger介导转染胃癌BGC823细胞, RT-PCR分析检测胃癌BGC823细胞中B-RAF基因以及Bcl-2基因的表达; MTT检测胃癌BGC823细胞增殖情况; 流式细胞仪检测细胞凋亡情况, 并与对照...
靶向survivin的siRNA表达载体的构建和表达及对HeLa细胞的影响
2007/7/25
survivin 是一类仅在肿瘤细胞中表达的凋亡抑制因子( IAP) ,在肿瘤的发生和发展过程中具有重要作用[1]。研究表明, 抑制survivin基因的表达可介导肿瘤细胞的凋亡，进而抑制肿瘤的生长[2]。本研究利用近年来广泛应用的RNA干扰技术( RNAi)，RNAi的技术优势包括：RNAi基因的抑制效果确切，抑制具有严格的序列特异性，治疗的针对性强，以及其具有级联放大效应和高穿透性更适合于恶性...
基于PCR的siRNA表达框的制备
2007/7/25
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是由双链RNA(double stranded RNA, dsRNA)引发的转录后的基因沉默。dsRNA经核酸酶降解成21-23nt的小片段干扰RNA(small interference RNA, siRNA)，并以其为模板，特定位点，特定间隔降解与之序列相应的mRNA。目前有多种制备siRNA的方法,其中 PCR制备的siRNA表达框架...
siRNA介导的MAPK p42沉默诱导HeLa细胞凋亡
2007/7/25
丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路，又称细胞外信号调节蛋白激酶(ERK) 级联途径，是介导细胞外生长因子刺激、调节细胞生长、发育、分裂、死亡以及细胞间功能同步等多种细胞生理过程的重要通路。其中，ERK 1/2途径控制着细胞的增殖[1]。ERK1/2信号转导通路可以由受体酪氨酸激酶、Ras、PKC或G蛋白偶联受体激活。在ERK1/2信号转导通路中，非活化的p42/44MAPK位于细胞质中，但...
分析siRNA沉默人胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1基因效果的相关因素。方法设计并体外转录合成4条靶向mdr1的siRNA(mdr1si326、mdr1si1513、mdr1si2631和mdr1si3071),转染SGC7901/VCR细胞,用RTPCR和免疫印迹检测mdr1mRNA和Pgp的表达、流式细胞仪检测细胞内阿霉素的蓄积和MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性,综合这4方面结果评价4条...
利用siRNA抑制HER-2表达的研究
HER-2 小干涉RNA（siRNA） 乳腺癌
2014/1/10
利用siRNA抑制人乳腺癌MCF-7细胞中HER-2基因的表达。方法针对HER-2mR-NA设计了5条siRNA,并构建相应的表达质粒,将质粒转染MCF-7乳腺癌细胞,筛选稳定表达株,利用RT-PCR分析siRNA对细胞中HER-2mRNA的降解作用;利用流式细胞术分析细胞表面HER-2蛋白的表达;利用裸鼠进行体内成瘤性实验,用免疫组化法检测瘤组织中HER-2的表达。结果siRNA3P能明显降低M...