搜索结果: 1-12 共查到“家畜生物化学 PCR”相关记录12条 . 查询时间(0.171 秒)
均匀设计优化野生狗牙根的SRAP-PCR反应体系
野生狗牙根 均匀设计 SRAP-PCR 体系优化
2009/10/14
采用均匀设计方法，对影响野生狗牙根SRAP-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶和模板浓度等分别进行了U16(45 )和 U12(35 )两轮优化，建立了适用于野生狗牙根的SRAP-PCR反应体系。该优化的25ul反应体系包含MgCl2 3.5 mmol/L，dNTPs 0.20nmol/L，引物0.44umol/L，TaqDNA聚合酶1.50 U，模板28ng/L。在此...
猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析
猪链球菌2型 福建株 CPS2J基因 PCR
2009/10/14
设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物，以猪2型链球菌福建株DNA为模板，筛选最佳反应条件，建立检测CPS2J基因的PCR方法，并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析。结果如下：应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株进行扩增，均获得与预期大小一致的675bp特异性目的片段，而对8株非2型猪链球菌的扩增结果均呈阴性；敏感性测定最低可检出100cfu细菌量或50pg 细菌DN...
猪源性成分的PCR检测技术优化研究
猪源性成分 PCR检测 反应体系 优化
2009/10/14
本试验研究目的是对食品和饲料中的猪源性成分PCR检测技术的反应体系进行优化。试验采用20μL的 PCR反应体系，分别测定Taq DNA聚合酶为0U、1U、2U、3U时；25mMol?L-1的MgCl2 为0μL、2μL、4μL、6μL时；dNTP为0μL、0.1μL、0.2μL、0.4μL时，其它PCR反应因素为最大量的结果，以优化猪源性成分PCR反应体系。试验结果：1、优化的猪源性成分PCR反应...
PCRRFLP技术检测嘉兴凤桥种猪氟烷基因
凤桥 猪 氟烷基因 PCR RFLP
2009/9/16
［目的］ 为凤桥镇通过合理利用氟烷基因提高猪肉品质奠定理论基础。［方法］ 从嘉兴县凤桥镇的规模化养猪场随机抽取种猪血样，通过PCRRFLP技术进行氟烷基因检测。［结果］ HhaⅠ内切酶的识别位点为5′GCG↓C3′。PCR扩增产物是含RYR1基因第1 843位点长度为659 bp的片段。如果猪的基因型为NN，由于未发生胞嘧啶C到胸腺嘧啶T的突变，可以看到2条带。如果猪的基因型为nn，由...
鹅源性成分PCR检测方法的建立
鹅 线粒体DNA 动物源性成分 聚合酶链式反应
2009/9/16
建立一种检测鹅源性成分的PCR方法。［方法］ 以15种动物的DNA为模板，利用鹅的特异性引物进行PCR反应，PCR 产物用1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序，检测引物的特异性和敏感性。［结果］ 通过PCR反应从鹅样品中扩增到了304 bp的目的片段，其他物种火鸡、鸭、鹌鹑、鸵鸟、鸽子、鸡、马、牛、羊、猪、狗、驴、猫、鱼和空白对照则无目的片段，表明该引物的特异性良好。鹅组织PCR产物的核苷酸序列与G...
多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌
猪 呼吸道病原 多重PCR 检测
2009/9/8
猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、副猪嗜血杆菌(Hps)、支气管败血波氏杆菌(Bb)、产毒性多杀巴氏杆菌(T+Pm)和猪肺炎支原体(Mhp)是最常见的几种猪呼吸道病原菌。笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的特异性引物，对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法。该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增，且在5种病原菌之间没有交叉反应；对大...
应用兼并引物RT-PCR快速检测及鉴别气载鸡新城疫病毒
鸡场 气载新城疫病毒 逆转录聚合酶链反应 检测
2009/9/8
为了快速检测并鉴别鸡舍内外空气中的新城疫病毒（NDV），应用AGI30气体收集器在一大型商品肉鸡舍舍内外收集气体，同时采集鸡的气管和泄殖腔拭子，采用兼并引物RTPCR检测气体样品和拭子中的NDV，并鉴别NDV的毒力；同时分离、纯化气体样品中的NDV，用常规毒力学试验鉴别分离株的毒力。结果RTPCR检测到舍内2/15的气体样品和4/15的拭子中同时有强毒和弱毒株,3/15气体样品和13/15的...
蒙古绵羊瘤胃固、液相附着微生物的RT-PCR检测
Real-time PCR 蒙古绵羊 瘤胃 微生物 生态分布
2009/8/31
【目的】应用Real-time PCR（RT-PCR）对蒙古绵羊瘤胃内容物固、液相附着微生物的生态分布进行定量研究。【方法】采集3只蒙古绵羊瘤胃内容物,固液分离后对各相中所附着的微生物进行定量检测,包括总细菌、总厌氧真菌和3种主要纤维降解菌－白色瘤胃球菌Ruminococcus albus、黄色瘤胃球菌Ruminococcus flavefaciens、产琥珀酸拟杆菌Fibrobacter suc...
【目的】克隆猪囊尾蚴AgB基因并在体外细胞中表达。【方法】采用 RT-PCR法分别扩增AgB基因的上半段和下半段序列。采用重叠延伸PCR法（splicing overlap extension PCR method，SOE-PCR）把具有35个相同碱基的上下半段扩增为全长基因，并构建到真核表达载体pVAX1，将酶切、PCR、测序鉴定的阳性质粒经脂质体转染 BHK-21细胞。通过SDS-PAGE、W...
Identification of Transferred Chicken Germ Cells in Quail Gonad and Semen by Amplification of Chicken-Specific PCR Products
microsatellite DNA chicken PCR primordial germ cells quail
2009/8/3
A polymerase chain reaction (PCR) primer set for a chicken microsatellite locus on the Z chromosome, LEI0171 (GenBank Accession No.X85538), amplified a 363bp fragment of genomic DNA in chickens (Gallu...
TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪脂蛋白酯酶mRNA方法的建立
猪 脂蛋白酯酶 实时定量RT-PCR TaqMan荧光探针
2008/10/27
【目的】克隆猪cDNA，作为猪LPL mRNA定量检测的标准品，建立检测方法。【方法】用RT-PCR，从猪背最长肌的总RNA中逆转录扩增LPL的cDNA，将纯化的LPL cDNA与pGM-T载体进行连接,转化宿主菌TOP10，提取重组质粒DNA，PCR鉴定并测序分析,对质粒标准进行实时荧光定量PCR 检测。纯化质粒并检测260 nm吸光度,确定原液的重组质粒拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度...
利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627 bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250 fg衣原体DNA。Real-Time PCR方法与免疫荧光方法的检测结果表明：检测4种衣原体临床样本，Real-Time PCR敏感性均在96%~98%；特异性均为100%；这两种方法符合率...