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搜索结果: 1-15 共查到基础医学 转染相关记录111条 . 查询时间(0.171 秒)
评价转染人血管内皮生长因子165(hVEGF 165)重组腺病毒载体的成纤维细胞体外表达状态及转染细胞修复放射性皮肤溃疡的效果。方法 构建hVEGF165基因过表达重组腺病毒载体,转染大鼠原代成纤维细胞,通过荧光定量PCR、免疫细胞化学和Western blot观察hVEGF165体外过表达状态;清洁级SD雄性大鼠24只,50 Gy γ射线局部照射,照后7 d于受照局部注射转染hVEGF165细胞...
研究耐辐射奇球菌pprI基因活体转染对小鼠急性放射损伤的防护作用。 方法 采用SPF级纯品系BALB/c雄性小鼠,应用活体电转染技术,将pEGFP-c1空载质粒及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入小鼠股前肌肉。应用60Co γ射线进行全身照射,死亡率观察组吸收剂量为6 Gy,观察照后30 d内小鼠死亡率的变化;放射效应观察组吸收剂量为4 Gy,于照后1、7、14、28和35 d观察小鼠外周...
通过构建表达载体、建立稳定转染RNA结合基序5(RNA binding motif 5,RBM5)的A549细胞系,初步研究RBM5基因过表达对A549 细胞增殖以及天冬-谷-丙-组氨酸盒多肽15[DEAH box polypeptide 15,DHX15]表达的影响。方法:应用分段克隆法构建pcDNA3.1(+)/RBM5真核表达载体;将测序验证后的重组质粒pcDNA3.1(+)/RBM5转染肺...
比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法 构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000,lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-...
5%山梨醇连续2次同步化恶性疟原虫培养物(8 h窗口),培养16 h后,直接孵育组(A组)将50 μl含寡核苷酸培养基与450 μl恶性疟原虫培养物(5%虫血率,1%血压积)混合孵育,Entranster-R试剂转染组(B组)将50 μl转染复合物(含寡核苷酸链和转染试剂)与450 μl恶性疟原虫培养物混合孵育,培养5 h后重悬,分别取出250 μl,1 500×g离心3 min,收集沉淀,进行荧...
5%山梨醇连续2次同步化恶性疟原虫培养物(8 h窗口),培养16 h后,直接孵育组(A组)将50 μl含寡核苷酸培养基与450 μl恶性疟原虫培养物(5%虫血率,1%血压积)混合孵育,Entranster-R试剂转染组(B组)将50 μl转染复合物(含寡核苷酸链和转染试剂)与450 μl恶性疟原虫培养物混合孵育,培养5 h后重悬,分别取出250 μl,1 500×g离心3 min,收集沉淀,进行荧...
探讨caspase募集结构域家族成员18(CARD18)在凋亡素诱导胃癌细胞凋亡的机制及在胃癌发生发展中的作用。方法 运用二维凝胶电泳法分离凋亡素作用胃癌细胞后表达的差异蛋白质, 通过基质辅助激光解吸附飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)和生物信息学方法确定其中部分差异蛋白质, RT-PCR和Western blot法检测CARD18的表达, 采用免疫组化检测56例胃癌组织及癌旁组织中CA...
大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因, 观察其作为起搏细胞的可行性。方法 取生长良好的ADSC转染hHCN2基因, 通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达, 用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养, 观察其对心室肌细胞自发性搏动的...
研究减数分裂重组蛋白11(MRE11)基因沉默对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的肝癌细胞株Bel7402/5-FU的化疗敏感性及耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响, 探讨MRE11与肝癌耐药性的关系。方法 采用阳离子脂质体法将shMRE11干扰质粒转染BEL7402/5-FU细胞, 实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测沉默效率; MTT法检测转染后BEL7402/5-F...
鉴定人脐带间充质干细胞(hUCMSC), 通过体外修饰增加体外合成mRNA转染hUCMSC的稳定性。方法 流式细胞仪检测hUCMSC免疫表型, 油红O和碱性磷酸酶染色分别进行成脂、成骨分化鉴定。体外合成EGFP的mRNA经polyA尾、帽子结构及碱基等方面的修饰转染hUCMSC, 流式检测荧光强度。Trypan blue染色观察mRNA转染对细胞活性的影响。结果 hUCMSC高表达CD29、CD4...
克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。 方法 采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。 结果 实时定量PCR证实TRAF3IP...
评价携带人源化绿色荧光蛋白(hrGFP)-人肝细胞生长因子(hHGF)的腺病毒载体对人永生化骨髓间充质干细胞UE7T-13生物学特征的影响,并探讨对超顺磁性氧化铁(SPIO)标记细胞进行体外MR成像的可行性。 方法 构建和包装携带hrGFP-hHGF基因的腺病毒载体;以hrGFP-hHGF腺病毒转染UE7T-13细胞,检测细胞中hrGFP表达阳性率、hHGF mRNA及细胞上清液中hHGF水平;检...
观察miR-130b对卡铂抗卵巢癌的增敏作用,探讨其相关的作用机制。方法 OVCAR细胞Lipofectiamine 2000转染miR-130b模拟物和无miR-130b基因功能的miR-130b阴性对照,荧光定量PCR检测转染效果。转染细胞给予对倍稀释卡铂100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.12, 1.56和0.78 μmol·L-1处理68 h。MTT法检测OVCAR细胞存...
探讨巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor, MIF)重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞后MIF的表达及其对CyclinD1表达的影响。方法 构建并鉴定重组真核表达质粒pEGFP-N1-MIF,转染人宫颈癌SiHa细胞;ELISA法检测细胞上清液中MIF的表达;real-time PCR及免疫细胞化学法检测细胞中MIF、CyclinD1 m...
将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株, 并研究转染后对p53-p21途径的影响。 方法 用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx 转染入肝癌细胞HepG2中, G418筛选出稳定转染X基因的细胞株。细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的恶性表型,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Western blot检测p53蛋白的表达,RT-PCR检测p21基...

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