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构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）基因的RNAi载体，探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响。方法：设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列，分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体，构建RNAi载体pGPU6-hTERT-1、2、3和阴性对照载体pGPU6-hTERT-NC，转染SW480 ...
研究靶向hTERT基因的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA对人结直肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的治疗作用。 方法： 于裸鼠右侧腋下皮下注射人结直肠癌SW480细胞建立结直肠癌移植瘤动物模型，随机分为生理盐水组（NS组）、pGPU6/GFP/Neo-NC-shRNA组（NC-shRNA组）和pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA组（hTERT-shRNA组），各组...
目的 研究多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF 7细胞的作用及其机制。方法 MCF 7细胞传代培养后分组加药第1组加入多西紫杉醇(多西紫杉醇组);第2组加入顺铂(顺铂组);第3组加入多西紫杉醇和顺铂(联合用药组);对照组为未加药的MCF 7细胞。加药24、48、72h后收集细胞,MTT法检测各组细胞生长抑制率， PCR ELISA法检测各组细胞端粒酶活性，RT PCR法检测端粒酶逆转录酶hTE...
观察人端粒酶逆转录酶基因（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）启动子驱动的肿瘤抑素(tamstatin)基因在肝癌细胞HepG2内特异性表达及其体外抗血管形成的作用。方法: 构建phTERT-tumstatin、pCMV-tumstatin（阳性对照）、phTERT-EGFP（阴性对照）质粒，脂质体介导转染HepG2肝癌细胞、L-02正常肝...
靶向hTERT基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
肠肿瘤 RNA干扰 慢病毒属 hTERT
2012/5/23
构建hTERT基因RNAi慢病毒载体,为大肠癌RNAi介导的基因治疗打下基础。方法 化学合成3条靶向hTERT基因的siRNA，转染大肠癌细胞SW480，48 h后采用RT-PCR方法筛选出一条对hTERT mRNA有明显抑制作用的siRNA。针对已经筛选确定的hTERT基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的Oligo DNA，退火形成双链DNA，与经XhoⅠ和Hpa Ⅰ酶切后的GP-Supersi...
端粒酶逆转录酶为端粒酶的催化亚单位，其活性与细胞对化疗药物的敏感性密切相关。本实验研究人肺腺癌Anip973/NVB耐药细胞株与亲代细胞Anip973细胞株端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase, hTERT）的mRNA表达及差异，探讨端粒酶与耐药的相关性。方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测人肺腺癌Anip973/NVB耐药细胞与Anip...
克隆hTERT启动子核心序列，研究hTERT启动子/SV40增强子在食管癌细胞中的联合转录活性。 方法 以人基因组DNA为模板，PCR扩增hTERT启动子核心片段；将其分别插入荧光素酶基因报告质粒pGL3-Basic和pGL3-Enhancer中，构建hTERT启动子调控的表达载体pGL3-hTERTp和由hTERT启动子/SV40增强子联合调控的表达载体pGL3-hTERTp-SV40en，将上...
端粒酶逆转录酶基因hTERT在肝细胞癌中的表达及端粒酶反义基因对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的影响
端粒酶逆转录酶基因 hTERT 肝细胞癌中的表达 端粒酶 反义基因 人肝癌细胞 HepG2细胞凋亡
2009/7/30
目的: 研究肝细胞癌(HCC)中端粒酶逆转录酶基因hTERT表达，探讨其在HCC发生、发展及预后复发中的意义.探讨抗端粒酶在肝细胞癌治疗中的意义.方法: 采用免疫组化法检测42例HCC组织中hTERT的表达，并对hTERT与临床病理特征的关系进行分析.将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2，体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化及致瘤性.结果: HCC...
食管癌及癌前病变组织中hTERT基因的表达
食管癌 癌前病变组织 hTERT基因
2009/7/29
目的: 探讨肿瘤相关基因端粒酶逆转录酶(hTERT)基因在食管癌及癌前病变组织中的表达及与细胞增生核抗原Ki-67的关系; 探讨hTERT基因对食管癌早期诊断及食管癌预后判定的价值.方法: 采用原位杂交法检测食管癌组织42例、不典型增生组织37例及正常食管组织12例中hTERTmRNA的表达; 用免疫组化S-P法检测Ki-67抗原表达.结果: 在正常食管黏膜、不典型增生、食管癌组织中，hTERTm...
构建人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）启动子调控的异种移植抗原α 1,3半乳糖基转移酶(α 1,3 galactosyltransferase, α 1,3GT）基因真核表达载体，研究其调控的α 1,3GT在肿瘤细胞中的靶向表达。方法：将前期克隆并测序正确的猪α 1,3GT基因定向克隆到pEGFP hTERT...
hTERT启动子的转录调控机制及其靶向性介导肿瘤治疗的研究进展
hTERT启动子 转录因子 靶向性 基因治疗
2009/4/22
端粒酶与肿瘤发生发展的关系是近年来肿瘤研究领域的热点之一。端粒酶是一种核糖核蛋白复合物,在绝大多数恶性肿瘤细胞中呈阳性表达，而在正常体细胞中则一般为阴性。端粒酶的活性表达主要是通过hTERT基因的转录机制严格调控的。端粒酶的活化与肿瘤的发生发展及细胞衰老和永生化关系密切。hTERT基因启动子为恶性肿瘤早期诊断、预后评估及基因治疗提供了新的思路。
siRNA 沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞
siRNA 沉默 hTERT基因表达 人 乳腺癌细胞
2009/2/12
目的 应用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT的表达，探讨其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的效应。方法 体外化学合成针对hTERT基因的siRNA序列，在脂质体介导下转染MCF7细胞，实时定量PCR检测hTERT mRNA表达水平，Western blot检测hTERT蛋白表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡状况，MTT法检测细胞增殖活性...
As2O3对裸鼠移植人乳癌组织NF-κB p65，p53，c-Myc和hTERT表达的影响。