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搜索结果: 1-15 共查到肿瘤病理学 siRNA相关记录29条 . 查询时间(0.203 秒)
探讨的siRNA沉默BRM增强胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的作用。方法:体外培养人胰腺癌PANC-1细胞,将阴性对照NC和BRM的siRNA转染到的Panc-1细胞,用RT-PCR和Western Blot法检测Panc-1细胞BRM的表达,以鉴定BRM siRNA沉默效果。用不同浓度的吉西他滨进行干预,检测细胞增殖率,计算半数抑制浓度(IC50),同时检测Panc-1细胞向前。率和Panc-1细胞...
探讨Foxp1对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 体外合成干扰Foxp1功能的小核酸片段(siRNA Foxp1),通过重组技术将其插入到慢病毒三质粒系统的转移质粒中,利用包装细胞(293T)将三质粒系统组装为完整的反转录慢病毒载体(lenti-pLL3.7-Foxp1-siRNA),感染高表达Foxp1的肝癌细胞株。同时构建不含有Foxp1-siRNA序列的直接三质粒系统包装的空病毒载体对照...
筛选针对STAT5A基因有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细 胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用。方法 设计并化学合成 针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、 Western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5A mRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段...
探讨小干扰RNAsiRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法 优化siRNA转染条件,将3条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列1、2和3)分别高效转染人肝癌HepG2细胞(A、B和C组),并设阴性对照组(NC组)及空白组。免疫印迹法检测转染72h各组CDCA5蛋白的表达水平。CCK-8法检测转染24、48、72、96...
探讨抑制血小板内皮细胞黏附因子-1(PECAM-1)表达对多药耐药基因1(MDR-1)及其编码产物P-糖蛋白(P-gp)的影响。方法 设计并化学合成针对PECAM-1的三条siRNA序列,命名为si-PECAM1,2,3,脂质体转染法将其转入CNE1/R,采用Semi-qRT-PCR、Western blot方法检测并筛选出抑制效果最好的si-PECAM序列,将筛选出的si-PECAM转入CNE1...
探讨靶向血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞的抑制效果。方法:设计靶向VEGF的4种小干扰RNA(small interfering RNAsiRNA),包括对称siRNAsiRNA21/21,siRNA23/23)与不对称siRNA(asymmetric siRNA, aiRNA;ai...
应用TPX2-siRNA转染Hela细胞,探讨TPX2基因沉默后对Hela细胞增殖和侵袭力及周期分布的影响。方法:合成TPX2特异性的siRNA 4对,随机siRNA阴性对照1对。Lipofectamine 2000介导siRNA转染Hela细胞株。RT-PCR检测转染前后mRNA表达的变化,Western blot检测转染前后蛋白表达的变化,MTT、流式细胞术(FCM)、Transwell小室和...
运用RNAi技术沉默食管癌EC9706细胞CXCR4(chemokine receptor4)基因表达,观察其对肿瘤细胞的生长和转移影响。方法设计CXCR4 基因为靶向的siRNA ,构建siRNA表达载体,通过脂质体将siRNA表达载体转入EC9706细胞。荧光定量PCR法检测细胞CXCR4 mRNA表达水平;流式细胞术检测细胞周期; MTT法检测细胞侵袭和增殖的情况。结果构建出CXCR4 基因...
目的:研究siRNA(small interference RNA)对bcl-2基因表达的抑制作用。 方法: 依据Ambion公司在网上提供的设计软件,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入U251细胞株,以未转染细胞以及bcl-2的反义药物G3139为对照,经MTT法检测siRNA对细胞生长的抑制以及流式细胞仪检测细胞周期的改变,用RT-PCR和免疫组织化学...
目的: 探讨siRNA干扰Slug基因表达对BxPC-3细胞γ射线敏感性的影响. 方法: 制备携带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的siRNA-Slug质粒载体, 用脂质体转染法将siRNA-Slug(实验组)、pGCL-GFP(阴性对照)导入BxPC-3细胞(空白对照组), G418筛选阳性细胞, 获得稳定转染的阳性克隆. 将转染载体的BxPC-3阳性克隆细胞和未转染载体的BxPC-3细胞采用6...
目的: 构建靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用. 方法: 设计合成靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA cDNA序列并与pSUPER载体连接, 构建VEGF siRNA表达载体, 经酶切鉴定和测序确认后, 脂质体2000介导VEGF siRNA转染HepG2细胞. RT-PCR及Western blot检测VEGF siRNA表达...
目的: 构建bcl-2特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步观察其对膀胱癌细胞生长的影响。方法: 根据GenBank 提供的bcl-2 cDNA序列,设计双链小干扰RNAsiRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(shRNA)的DNA 序列,并与含U6启动子的pGenesil-1质粒定向连接,构建真核表达载体pGenesil-1545、pGenesil-1555。经限制性内切酶酶切和D...
目的:探讨慢病毒载体介导survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制,为肺癌基因治疗新策略提供帮助。方法:构建表达survivin-siRNA的慢病毒载体感染A549细胞株,测定病毒滴度。采用RT-PCR、免疫组化及Western blotting等检测感染后不同分组A549细胞survivin-mRNA和蛋白的变化及caspase-3蛋白的变化,通过流式细胞仪及MTT...
目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。 方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平,MTT法测定细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。 结果:转染72 h后,两个实...
研究RNA干扰技术沉默Stat3基因对食管鳞癌细胞(EC9706)中持续性激活Stat3信号的阻断作用及对细胞凋亡的影响。方法:将化学合成的100nM的Stat3 siRNA转染EC9706细胞,RT-PCR检测转染前后Stat3 mRNA的表达,Western blot检测转染前后细胞中Bcl-2、Stat3及磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的表达,凝胶电泳迁移率(EMSA)检测转染前后活...

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