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QuantStudioTM 6 Flex实时荧光定量PCR
山西医科大学转化医学研究中心荧光定量PCR仪(图)
采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的基因片段进行融合,同时对2种方法进行比较。方法?采用一步法及两步法融合基因技术,对5种立克次体融合基因进行构建,并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量,以提高2种方法的融合效率。
建立一种基于多重实时荧光定量PCR(MRT-PCR)技术的可同时检测14种高危亚型人乳头瘤病毒(HPV16、18、31、33、35、39、52、45、51、56、58、59、66、68)癌基因E6/E7 mRNA的方法。方法?对14种高危型HPV各自的E6/E7基因序列区域设计特异性引物和探针,配以优化的反应体系,形成HPV E6/E7 mRNA检测体系,评价方法检出限、特异性。收集223例临床样...
总结临床PCR 实验室参加室间质量评价活动的PT 结果,探讨现场审核与否对室间质评结果的影响, 进而分析实验室现场审核对其质量管理的影响。方法 统计分析2008~2019 年陕西省临床检验中心PCR(HBV-DNA, HCV-RNA) 参评实验室室间质评活动结果。
探讨QF-PCR联合染色体核型分析在羊水产前诊断中的应用价值。方法 回顾性分析 2011年1月至2018年12月在广州市妇女儿童医疗中心产前诊断中心行产前诊断的16 314例孕妇资料,所有羊水标本同时采用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,QF-PCR)技术和染色体核型分析技术进行分析。
基于SYBR Green Ⅰ荧光染料建立鉴定鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MA)的荧光PCR熔解曲线法,为临床鉴定MA提供简单、准确性高的分子生物学检测方法。 方法:以MA的特异性插入序列IS1311为检测靶标设计引物,在60 ℃的退火温度下,建立鉴定MA的SYBR Green Ⅰ荧光PCR熔解曲线方法,并对MA等21种分枝杆菌标准株和金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌进行检测,...
评价总胆红素、三酰甘油、血红蛋白和总免疫球蛋白G(IgG)对荧光定量PCR测定HBV DNA的干扰。 方法:参照EP7-A2方案对HBV DNA测定进行干扰评价试验。采用配对差异试验验证厂家的干扰声明,对不符合声明的干扰物通过剂量效应试验分析干扰物浓度与干扰程度之间的关系。
建立肠道腺病毒(Adv)、诺如病毒G1及G2型(NoV G1和NoV G2)、A组轮状病毒(RV A)、扎如病毒(SV)及星状病毒(HAstV)5种儿童腹泻病毒多重PCR-毛细管电泳法检测体系。 方法:针对Adv、NoV G1、NoV G2、RV A、SV及HAstV保守序列设计特异性引物,设计并优化腹泻病毒的多重PCR-毛细管电泳检测体系,琼脂糖凝胶电泳确认扩增片段;进行性能(灵敏度、特异性)评...
用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术快速准确鉴定外阴阴道念珠菌病(VVC)相关念珠菌菌种,并对科玛嘉显色培养法、Vitek 2 YST鉴定卡和PCR-RFLP 3种方法鉴定念珠菌菌种的效果进行方法学评价。 方法:收集贵阳市妇幼保健院VVC患者感...
建立指环病毒(Torque teno virus,TTV)6实时荧光定量PCR检测体系,并验证检测体系的敏感性与特异性。根据GenBank中登录的TTV6基因序列设计引物与FAM-Eclipse探针,建立基于FAM-Eclipse探针法的实时荧光定量PCR检测方法,建立标准曲线并进行敏感性与特异性分析。
建立一种可以同时鉴别寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的检测方法。通过全球共享数据库中检索下载寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒全基因组序列进行比对分析,估计其保守区,确定靶基因位置,针对这3种病毒分别设计特异性引物和探针,建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,对方法的特异性、灵敏性和重复性进行评估。
局部晚期直肠癌(LARC)目前的基本治疗策略是新辅助放化疗(nCRT)和随后的全直肠系膜切除术(TME)。nCRT 后的肿瘤消退在个体间差异显著,病理完全缓解(pCR)是 LARC 的预后因素。明确放化疗反应的预测因素有助于临床医生鉴别可能从多模式治疗中获益的患者,并在早期对其预后进行评估。本文结合近年的相关研究,探讨LARC在新辅助治疗后可能达到pCR的分子预测因子。
NS0宿主细胞残留DNA检测(定量PCR-Taqman探针法)方法的验证。方法 针对小鼠骨髓瘤细胞(NS0)基因组重复序列设计合成多对引物、探针,通过实验优选最佳的引物探针组合;应用所建立的前处理试剂盒(磁珠法)对供试品中宿主细胞残留DNA进行富集纯化;根据《国际人用药品注册技术协调会(ICH)》及《中国药典》通则9101的要求,应用所建立的NS0宿主细胞DNA残留检测试剂盒进行线性与范围、准确度...
应用QIAxcel毛细管电泳系统建立一种能够同时检测7种鼠传病原体的多重PCR检测方法。方法 应用微生物数据分析云平台(https://analysis.mypathogen.org/)中"special marker gene"工作流,筛选恙虫病东方体、嗜吞噬细胞无形体、莫氏立克次体、土拉弗朗西斯菌、贝氏柯克斯体、问号钩端螺旋体和巴尔通体特异基因,据此设计引物。根据温度转换PCR原理构建特异性嵌...

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