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纳米载体在共负载siRNA及化疗药物对逆转肿瘤多药耐药性方面的应用
RNA干扰技术 基因调控 逆转多药耐药性 纳米载体
2022/3/31
探讨雷诺丁受体1(RYR1)表达下调对小鼠成肌细胞C2C12中线粒体的影响及其发生机制。方法:采用小干扰RNA(siRNA)敲减C2C12细胞的RYR1表达,应用透射电镜对线粒体进行体视学分析,观察细胞内线粒体数目和形态学的改变,应用real-time PCR和Western blot方法检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)和细胞外信号调节激...
研究应用 siRNA抑制Nrf2基因表达后对乙酸铅染毒所致TK6细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 体外培养 TK6细胞,设正常组、阴性对照组及 Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3转染组。Western blot验证转染效果,筛选出干扰效果最佳序列。采用 480 μmol/L的乙酸铅染毒TK6细胞,运用流式细胞技术、2',7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)...
siRNA沉默BRM增强磷酸钙对吉西他滨敏感性的作用机制研究
siRNA沉默 胰腺癌 吉西他滨
2020/12/23
探讨的siRNA沉默BRM增强胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的作用。方法:体外培养人胰腺癌PANC-1细胞,将阴性对照NC和BRM的siRNA转染到的Panc-1细胞,用RT-PCR和Western Blot法检测Panc-1细胞BRM的表达,以鉴定BRM siRNA沉默效果。用不同浓度的吉西他滨进行干预,检测细胞增殖率,计算半数抑制浓度(IC50),同时检测Panc-1细胞向前。率和Panc-1细胞...
探讨siRNA沉默CD99基因表达对髓母细胞瘤细胞系DAOY细胞增殖和凋亡的影响。方法 利用CD99 siRNA转染髓母细胞瘤DAOY细胞,细胞分为沉默1组(转染CD99 siRNA-1#)、沉默2组(转染CD99 siRNA-2#)、对照组(转染siRNA阴性对照),采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测沉默效果。利用CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细...
探讨HPV16E6 siRNA联合5-Aza-CdR(5-aza-2'-deoxycytidine,5-氮-2'-脱氧胞苷,又称地西他滨)对宫颈癌SiHa细胞中E-钙黏蛋白表达和基因甲基化的影响。方法:采用SiHa细胞构建的HPV16E6 沉默细胞株及5-Aza-CdR细胞株,检测细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及E-cadherin甲基化状态。采用细胞黏附、Transwell体...
siRNA干扰PTX3基因对子宫内膜癌细胞增殖的影响
PTX3 细胞增殖 AKT通路 子宫内膜癌
2020/8/7
探讨siRNA干扰PTX3基因在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法:实时荧光定量PCR法检测子宫内膜癌组织中PTX3基因的表达。MTT法检测人子宫内膜癌RL95-2细胞增殖能力。流式细胞术检测RL95-2细胞周期分布。Western blot检测RL95-2细胞PTX3、p-AKT和AKT蛋白表达水平。
探讨沉默TRIM29基因表达对鼻咽癌细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将人鼻咽癌5-8F细胞分为空白组、阴性对照(NC)组(转染阴性对照siRNA)和si-TRIM29组(转染TRIM29的特异性siRNA),通过CCK-8法检测si-TRIM29转染5-8F细胞0~96 h的细胞活力。通过流式细胞术及Western blot分别检测si-TRIM29转染5-8F细胞48 h的细胞凋...
观察白介素-1β(IL-1β)小干扰RNA(siRNA)对脊髓钝挫伤(spinal cord contusion,SCC)大鼠运动功能的影响,并探讨其相关机制。方法:98只雌性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、单纯SCC组(SCC组)、空载体组(Vector组)和慢病毒干扰组(IL-1β SH组)。IL-1β SH组和空载体组术前48h在拟损伤脊髓节段局部注射IL-1β siRNA或空...
探讨siRNA沉默CD44表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法利用RNA干扰技术在人胆囊癌细胞株EH-GB1和GBC-SD中敲低CD44的表达;通过CCK8实验检测si-NC和si-CD44对人胆囊癌细胞株EH-GB1和GBC-SD增殖能力的影响;通过Transwell迁移实验检测其对迁移能力的影响;通过Transwell侵袭实验检测其对侵袭能力的影响。
采用siRNA技术沉默IFITM1基因表达,观察对卵巢癌CP70细胞侵袭及凋亡能力的影响及其可能的分子机制。方法:利用脂质体转染法将靶向IFITM1的小干扰RNA转染卵巢癌CP70细胞株;Western blot检测CP70细胞IFITM1蛋白的表达;Transwell侵袭小室、MTT、流式细胞仪检测转染细胞侵袭力、顺铂敏感性和凋亡的变化;Western blot观察转染后CP70细胞caspas...
探讨敲减IQGAP1基因表达对脑胶质瘤细胞侵袭、迁移及免疫抑制的影响及机制。方法:将人脑胶质瘤U251细胞随机分为空白组、阴性对照组和si-IQGAP1组,AG490作为STAT3信号通路抑制剂。转染48 h后,MTT法检测细胞活力;Western blot检测IQGAP1、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、STAT3和p-STAT3的蛋白水平;Transwell小室...
探讨siRNA抑制抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:建立阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组,单纯的siRNA-Nox2转染组,阿霉素模型组及siRNA-Nox2转染+阿霉素处理组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激...
16型鼻病毒感染引起H1-HeLa细胞的内源性siRNA变化
siRNA 16型鼻病毒 高通量测序
2020/3/10
观察鼻病毒16型感染H1-HeLa细胞后的细胞内源性siRNA变化。将鼻病毒16型感染H1-HeLa敏感细胞12 h、24 h、36 h后,利用高通量测序(二代测序)筛选出差异siRNA,再通过qRT-PCR方法进行验证。